小鼠精子形成过程中自噬体形成与脂滴积聚的动态变化
Dynamic changes in autophagosome formation and lipid droplet accumulation during spermiogenesis in mice
摘要目的 研究精子变形过程中自噬体的形成与曲细精管中脂滴的时空关系,为探究精子形成的能量来源提供依据.方法 选用健康成年野生型雄性小鼠,借助免疫组化染色和 Western blot,检测自噬标志蛋白微管相关蛋白轻链 3(LC3)在睾丸中的表达特征,使用透射电镜观察睾丸中的自噬体;通过油红 O染色法观察曲细精管中脂滴的分布,结合ATP以及ATP 酶的检测探讨脂滴与能量变化的关系.结果 变形精子和支持细胞中存在自噬体;LC3 主要在变形精子胞质中表达,Ⅱ-Ⅳ期长形精子中逐渐升高,其胞质中脂滴也逐渐增多,Ⅶ-Ⅷ期精子和残余体中脂滴最高,随后下降;而支持细胞中的脂滴Ⅸ-Ⅰ期处于高位水平,Ⅱ-Ⅷ期很低,曲细精管中的ATP含量与之类似,ATP酶的活性与之相反.以上结果均有明显的生精周期依赖性改变.结论 在小鼠精子变形过程中,LC3 的表达水平、自噬体的出现和精子细胞内的脂滴、支持细胞内的脂滴以及曲细精管内ATP和ATP酶的含量呈现非常紧密的时空相关性,提示它们协同在这个剧烈的细胞改建时期发挥作用,为精子形成提供能量.
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