基于Hsp90的荧光分子探针的构建与胰腺肿瘤识别效应评价
Construction of Hsp90-based fluorescent molecular probe and evaluation of pancreatic tumor recognition effects
摘要目的 构建以肿瘤热休克蛋白90(Hsp90)为靶点的荧光分子探针,增强对肿瘤的特异性识别.方法 以人胰腺癌细胞系PANC-1、人小细胞肺癌细胞系NCI-H446为研究对象,通过流式细胞测量术以及免疫荧光法研究肿瘤细胞对Cy5-P7的摄取和清除能力;通过热休克蛋白 90 单克隆抗体阻断PANC-1 细胞表面蛋白研究Cy5-P7 是否通过Hsp90介导进入细胞;将人胰腺癌细胞系PANC-1注射到BALB/c裸鼠后背部皮下,构建异种皮下肿瘤模型验证Cy7-P7的体内肿瘤识别能力以及体内分布.结果 在低温条件下细胞对Cy5-P7 的摄取量显著降低(P<0.05);使用热休克蛋白90单克隆抗体阻断后,Cy5-P7处理过的细胞内平均荧光强度明显降低(P<0.05);Cy7-P7 组肿瘤部位荧光强度高于对照组(P<0.05),Cy7-P7在肾脏和肿瘤存在明显的荧光.结论 Cy5-P7 能够有效靶向Hsp90,其特异性结合显著增强了细胞对Cy5-P7荧光探针的摄取能力,提高了荧光成像的灵敏度和准确性.Cy7-P7 在体内表现出良好的肿瘤主动识别能力,能够在肿瘤部位富集,并能在48h代谢排出体外,为精准肿瘤识别提供了有力支持.
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