换一批
换一批乙型肝炎病毒基因组中前-X-编码基因启动子序列的确定及转录活性的鉴定
IDENTIFICATION OF PRE-X PROMOTER SEQUENCE IN HEPATITIS B VIRUS GENOME AND APPRAISAL OF ITS TRANSCRIPTION ACTIVITY
摘要：
利用长距离精确聚合酶链反应(LA-PCR)扩增慢性乙型肝炎患者血清来源的5个全长的HBV基因组DNA,在分析不同克隆之间的序列变异程度时,发现所获得的5个克隆在X区之前可能还存在一个开放读码框架(ORF),长度168bp,编码56个氨基酸残基(aa),并将其暂时命名为前-X(pre-X).为了解前-X编码区上游DNA序列是否具有启动子活性,选取翻译起始密码子ATG上游225bp的基因片段,将其克隆至报告基因表达载体pCAT3中,构建pCAT3-前-X-promoter表达载体,以该质粒转染HepG2细胞,用ELISA法检测报告基因编码产物氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达活性.结果发现,质粒pCAT3-前-X-promoter能够指导CAT的表达,吸光度(A值)是pCAT3的3.5倍,提示pCAT3-前-X-promoter中插入的DNA序列具有启动子活性,说明这一段基因序列中存在新的启动子区,为研究、界定前-X的ORF的存在提供了直接的依据.
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作者：
作者单位：
100039,北京,解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心
[1]
期刊：
《解放军医学杂志》2003年28卷9期 763-765页
ISTICPKUCSCD
分类号：
R512.6+2
栏目名称：
专题研究
DOI：
10.3321/j.issn:0577-7402.2003.09.003
发布时间：
2003-12-26
基金项目：
国家自然科学基金
军队科技攻关青年基金
军队科技攻关项目
军队杰出人才基金
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