抗丙型肝炎病毒核心蛋白单链抗体的制备及免疫组织化学研究
Preparation and immunohistochemical study of human single chain Fv antibody against hepatitis C virus core antigen
目的制备丙型肝炎病毒核心蛋白单链抗体并进行免疫组织化学研究.方法以大肠杆菌表达的重组丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白为固相抗原,利用抗原-抗体亲和性结合的原理,从半合成的人源可变区噬菌体抗体库中经过3轮"吸附-洗脱-扩增"的筛选过程及酶联免疫吸附试验(ELISA)和DNA序列分析,获得HCV核心蛋白的人源单链抗体;用该抗体对7721转染全长HCV cDNA后筛选的阳性克隆细胞中的HCV核心蛋白抗原进行免疫组化鉴定.结果ELISA结果表明,制备的HCV核心蛋白人源单链抗体能与HCV核心蛋白抗原特异性结合;免疫组化结果表明,该抗体能够特异性识别HCV核心蛋白抗原,与正常肝细胞无交叉反应.结论此法制备单链抗体方法简便,周期短,可为HCV核心蛋白病原的检测提供新的检测手段.
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