应用噬菌体展示技术筛选丙型肝炎病毒非结构蛋白NS4A结合蛋白-论文-万方医学网

应用噬菌体展示技术筛选丙型肝炎病毒非结构蛋白NS4A结合蛋白

Screening of binding protein of hepatitis C virus NS4A by phage display from human liver cDNA library

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摘要：

目的筛选丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白NS4A结合蛋白,为HCV致病机制的研究探索新的途径.方法应用噬菌体展示技术,以HCV非结构蛋白NS4A作为固相筛选分子,对T7噬菌体人肝细胞cDNA文库进行5轮"吸附-洗脱-扩增"的筛选过程,经噬斑的PCR扩增后,构建克隆载体,最后对所筛选克隆进行DNA序列测定和同源性分析.结果噬菌体经富集后,从随机挑选的12个克隆中得到2个阳性克隆,成功构建了克隆载体.序列测定后经过序列同源性分析,确定了与HCV非结构蛋白NS4A结合的是肝细胞蛋白-丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)激活蛋白激酶5(MAPKAPK5).结论用噬菌体人肝cDNA文库筛选得到了HCV非结构蛋白NS4A的结合蛋白,为进一步研究HCV的致病机制奠定了良好的基础.

作者：钟彦伟 ^[1] 成军 ^[1] 张忠东 ^[1] 杨艳杰 ^[1] 李强 ^[1] 董菁 ^[1] 黄燕萍 ^[1] 刘敏 ^[1] 王建军 ^[1]

作者单位： 100039,北京,解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心 ^[1]

期刊：《解放军医学杂志》2004年29卷1期 20-22页 ISTICPKUCSCD

关键词：噬菌体展示技术 C型肝炎样病毒属病毒非结构蛋白质类基因文库

主题词：蛋白(Egg White)细菌噬菌体(Bacteriophages)肝炎病毒属(Hepacivirus)肝炎(Hepatitis)病毒(Viruses)

分类号： R512.6+3

栏目名称： 专题研究

DOI： 10.3321/j.issn:0577-7402.2004.01.008

发布时间： 2004-04-09

基金项目：

国家自然科学基金

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被引：5
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