应用噬菌体展示技术筛选乙型肝炎病毒表面抗原基因启动子Ⅱ结合蛋白-论文-万方医学网

应用噬菌体展示技术筛选乙型肝炎病毒表面抗原基因启动子Ⅱ结合蛋白

Screening of binding protein of surface protein promoter Ⅱ DNA of hepatitis B virus by phage display from human liver cDNA library

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摘要：

目的通过筛选乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原基因启动子Ⅱ(SPⅡ)结合蛋白,为HBV复制机制的研究探索新的途径.方法应用噬菌体展示技术,以HBV的表面抗原基因启动子Ⅱ的聚合酶链反应(PCR)产物DNA作为固相筛选分子,对噬菌体人肝细胞cDNA文库进行5轮"吸附-洗脱-扩增"筛选过程,经噬斑的PCR扩增后,构建克隆载体,最后对所筛选克隆进行DNA序列测定和同源性分析.结果噬菌体经富集后,从随机筛选的20个克隆中得到4个阳性克隆,成功构建了克隆载体.序列测定后经过同源性分析,确定了和HBV SPⅡ结合的肝细胞蛋白--尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶4(NADHDH4).结论用噬菌体人肝cDNA文库筛选得到了HBV SPⅡ的结合蛋白,分析了该蛋白的编码基因,为进一步研究HBV的复制、转录、调节机制开辟了新的途径.

作者：杨艳杰 ^[1] 成军 ^[2] 陈东风 ^[1] 钟彦伟 ^[2] 张忠东 ^[2] 王建军 ^[2] 刘妍 ^[2]

作者单位： 400042,重庆,第三军医大学大坪医院 ^[1] 解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心 ^[2]

期刊：《解放军医学杂志》2004年29卷1期 23-26页 ISTICPKUCSCD

关键词：噬菌体展示技术肝炎病毒,乙型抗原,表面启动区(遗传学)筛选

主题词：细菌噬菌体(Bacteriophages)蛋白(Egg White)基因(Genes)抗原, 表面(Antigens, Surface)乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus)

分类号： R512.6+3

栏目名称： 专题研究

DOI： 10.3321/j.issn:0577-7402.2004.01.009

发布时间： 2004-04-09

基金项目：

国家自然科学基金 军队杰出人才基金 军队科技攻关青年基金 军队科技攻关项目

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被引：9
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