RNAi沉默dUTPase对SW620细胞黏附的影响
The effect of inhibition of dUTPase expression by RNAi on adhesive ability of SW620 cell
摘要目的采用RNAi沉默dUTPase的表达,观察SW620细胞黏性的改变.方法合成两条编码发夹siRNA序列的单链DNA,并将其克隆到pSilenCircle载体中, 构建重组质粒sidUTPase/pSilenCircle和无关基因的重组质粒siFly/pSilenCircle.以上述重组质粒分别转染SW620细胞, RT-PCR和Western blot检测dUTPase的表达, 异质黏附实验分析细胞黏附性的改变.结果成功地构建了2个dUTPase发夹siRNA的真核表达载体sidUTPase/pSilenCircle和无关基因重组质粒siFly/pSilenCircle.与siFly/pSilenCircle转染组比较,sidUTPase/pSilenCircle转染组 SW620细胞dUTPase的表达明显下调, 细胞异质黏附能力减弱.结论构建的dUTPase 发夹siRNA 的真核表达载体sidUTPase/pSilenCircle可有效抑制SW620细胞的dUTPase表达,降低细胞的异质黏附性.
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