换一批摘要为了在人乳腺肿瘤上皮细胞系中表达重组人胶质细胞源性神经营养因子（ GDNF ），本研究构建了牛β－casein基因启动子驱动的重组人GDNF乳腺上皮细胞特异表达载体，用脂质体介导法将其导入人乳腺肿瘤上皮细胞系Bcap－37细胞中，经G418抗性筛选8～10 d后，分离稳定表达红色荧光蛋白的转染细胞，PCR鉴定转基因细胞，用催乳素、胰岛素及氢化可的松诱导培养转基因细胞，RT－PCR和Western Blot检测重组人GDNF的表达分泌。结果表明：重组人GDNF乳腺上皮细胞特异表达载体被成功构建，转染Bcap－37细胞后，稳定整合到细胞染色体中，转基因细胞经激素诱导后能够表达分泌糖基化的 GDNF，为高效制备与天然人GDNF蛋白结构完全一致的重组人GDNF蛋白用于帕金森病临床治疗研究奠定了基础。
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DOI
10.15889/j.issn.1002-1302.2015.02.006
发布时间
2015-03-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（31060304）
内蒙古高等学校科学研究项目（NJ10184）
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