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旋覆花水提物的TLC和HPLC特征图谱及6种化学成分的含量测定

Establishment of characteristic chromatograms of TLC and HPLC and determination of six components in water-extract of Inula japonica

摘要目的 建立旋覆花水提物的薄层色谱(TLC)和高效液相色谱(HPLC)的特征图谱,同时建立水提物中6种成分(绿原酸、咖啡酸、异槲皮苷、1,5-二咖啡酰奎宁酸、4,5-二咖啡酰奎宁酸和旋覆花内酯)的含量测定方法,评价11批旋覆花药材水提物的相似性.方法 (1)采用HF254型薄层层析硅胶板、正丁醇-丙酮-吡啶-水-冰醋酸(1∶5∶3∶1∶10μL)为展开剂,在365 nm波长下检视喷洒10%硫酸-乙醇前、后的色谱斑点,建立TLC特征图谱.(2)采用Sino-Chrom ODS-BP(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为0.05%磷酸溶液-乙腈的梯度洗脱程序,流速0.8 mL/min,柱温35℃,检测波长205 nm,建立HPLC特征图谱.(3)6种成分的含量测定条件与(2)相同,但检测波长分别为203 nm(旋覆花内酯)、256 nm(异槲皮苷)和327 nm(咖啡酸、绿原酸、1,5-二咖啡酰奎宁酸、4,5-二咖啡酰奎宁酸).结果 (1)喷洒显色剂前、后的TLC图谱均显示出良好的特征性.(2)HPLC特征图谱显示含有28个共有峰,指认出10个峰(绿原酸、咖啡酸、1,5-二咖啡酰奎宁酸、4,5-二咖啡酰奎宁酸、花旗松素、芦丁、槲皮苷、异槲皮苷、木犀草素和旋覆花内酯).通过相似度评价和聚类分析可知11批旋覆花水提物相似度良好.(3)绿原酸、咖啡酸、异槲皮苷、1,5-二咖啡酰奎宁酸、4,5-二咖啡酰奎宁酸和旋覆花内酯6种成分的线性范围分别为3.25~65.00、4.00~80.00、1.60~32.00、17.75~355.00、2.50~50.00和3.75~75.00μg/mL.11批旋覆花水提物中绿原酸、咖啡酸、异槲皮苷、1,5-二咖啡酰奎宁酸、4,5-二咖啡酰奎宁酸和旋覆花内酯的平均含量分别为3.38~6.66、2.13~7.35、0.51~1.57、15.81~24.87、0.50~1.08和0.77~4.73μg/mg.结论 该方法的TLC和HPLC特征图谱分离效果良好,含量测定方法可靠,可为旋覆花水提物质量控制方法提供实验依据.

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2024年48卷3期

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