换一批摘要目的 探讨microRNA-543(miR-543)通过调控其靶基因自噬相关基因7(ATG-7)对肝癌细胞凋亡的影响.方法 通过荧光定量PCR及western blot实验观察多株肝癌细胞株里miR-543和ATG-7的表达情况;选取与人源胚胎肾细胞(293T)相比ATG-7高表达的HepG2肝癌细胞分组,瞬时转染miR-543摸拟物和miR-543抑制剂,在HepG2细胞中使用Western blot方法检测ATG-7蛋白表达变化,再使用qRT-PCR检测miR-543和ATG-7的mRNA水平;经过microRNA数据库预测miR-543与ATG-7的结合区域,构建ATG-73'UTR野生型及突变型的荧光素酶质粒和miR-543质粒后,通过荧光素酶报告基因实验观察野生型及突变型的荧光素酶活性变化;用流式细胞仪检测转染miR-543模拟物和ATG-7质粒的HepG2细胞凋亡情况.结果 多株肝癌细胞株中ATG-7蛋白水平表达情况不一,ATG-7的mRNA和miR-543表达水平呈负相关;选用ATG-7相对高表达的HepG2细胞,过表达miR-543后发现miR-543 mRNA升高后,ATG-7蛋白和mRNA水平随之降低;降低miR-543,ATG-7蛋白和mRNA水平随之升高;通过荧光素酶报告基因证实miR-543结合ATG-7 mRNA 3'UTR区域的特定序列来降低ATG-7的mRNA水平;通过细胞凋亡实验证实miR-543通过下调ATG-7抑制肝癌细胞凋亡.结论 在肝癌细胞中miR-543下调ATG-7抑制肝癌细胞的凋亡.
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分类号
R735.7（消化系肿瘤）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1006-2238.2023.03.003
发布时间
2023-06-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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