换一批摘要为探讨由Argonaute 2 (Ago2)介导的LncRNA-miRNA调控系统在贝类生物矿化(Biomineralization)的调控机制,本研究利用RACE技术克隆获得马氏珠母贝(Pinctada fucata martensii)Ago2 (PmAgo2)基因cDNA全长序列并检测其表达.结果 表明,PmAgo2全长3 465 bp,开放阅读框(open reading frame,ORF)2 679 bp,编码892个氨基酸残基,5'UTR为113 bp,3'UTR为673 bp;预测其分子量为101.061 39 kD,理论等电点为9.48;多序列比对的结果表明,PmAgo2与脊椎动物和其他无脊椎的Ago2具有较高的保守性,与美洲牡蛎(Crassostrea virginica)的相似度高达88％;qRT-PCR结果显示,PmAgo2在马氏珠母贝各个组织均有表达,外套膜边缘膜区的表达量最高.利用脊椎动物Ago2抗体,通过Western blotting检测其在外套膜组织中的表达,发现Ago2蛋白的分子量在100 kD左右,与理论的分子量相一致.本研究结果为后期深入研究由Ago2介导的LncRNA-miRNA非编码RNA调控系统奠定基础.
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