穿心莲内酯调控Nrf2/HO-1通路减轻百草枯诱导的Ⅱ型肺泡上皮细胞氧化损伤
Andrographolide alleviates paraquat-induced oxidative stress injury of alveolar epithelial type Ⅱ cells via Nrf2/HO-1 pathway
摘要目的 探讨穿心莲内酯(Andrographolide)减轻百草枯(PQ)诱导的小鼠Ⅱ型肺泡细胞(MLE-12)氧化应激损伤.方法 常规培养MLE-12细胞,分为对照组、PQ组、0.1%DMSO+PQ组和穿心莲内酯+PQ组;给予25μmol·L-1穿心莲内酯预处理6 h,后给予800μmol·L-1 PQ干预24 h.CCK-8检测细胞活性;RT-qPCR和Western blot检测Nrf2和HO-1 mRNA和蛋白水平;试剂盒检测细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和过氧化氢酶(CAT)水平;流式细胞仪和荧光显微镜检测细胞内的活性氧(ROS)水平.结果 PQ能够降低MLE-12细胞活性,并呈剂量依赖性;PQ为200μmol·L-1、400μmol·L-1、800μmol·L-1、1200μmol·L-1和2000μmol·L-1对应细胞活性为89.5%、74.27%、58.65%、37.65% 和26.83%.浓度为25μmol·L-1及以下的穿心莲内酯对MLE-12细胞活性无明显抑制作用.800μmol·L-1 PQ显著降低MLE-12细胞活性(P<0.01),穿心莲内酯(5、10、25μmol·L-1)显著改善PQ诱导的细胞活性(P<0.01).25μmol·L-1穿心莲内酯+PQ组SOD、CAT表达水平较PQ组明显升高,而MDA和ROS较PQ组明显下降,差异显著(P<0.05).与PQ组比较,25μmol·L-1穿心莲内酯干预后Nrf2和HO-1 mRNA和蛋白水平明显升高,差异显著(P<0.05).结论 穿心莲内酯能够对百草枯介导的氧化应激损伤起保护作用,机制可能与增强Nrf2/HO-1抗氧化应激通路有关.
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