换一批用非整合重编程技术构建人外周血单个核细胞来源的诱导多能干细胞
Generation of human induced pluripotent stem cells from peripheral blood mononuclear cells using the non-integrating reprogramming technique
摘要目的 用非整合重编程技术构建人外周血单个核细胞(PBMC)来源诱导多能干细胞(iPSC).方法 收集健康人外周血标本,分离PBMC,用含4个重编程转录因子(OCT3/4、SOX2、KLF4和c-MYC)的仙台病毒感染PBMC,并用无饲养层细胞的培养体系培育获得iPSC.通过细胞形态学、碱性磷酸酶(AP)染色、免疫荧光染色、拟胚体形成和分化实验对iPSC细胞进行多能性验证;用核型分析和仙台病毒基因组RNA检测对其进行安全性验证.结果 在仙台病毒感染后16 d后,PBMC出现iPSC样克隆.iPSC可进行传代培养,且经多能性验证实验证明其具有多能性;安全性验证结果表明,iPSC核型正常,外源性病毒基因组RNA可被完全清除.结论 建立了对PBMC进行非整合重编程的诱导体系,并获得了具有多能性、核型正常且不合外源基因的iPSC.
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关键词
人外周血单个核细胞重编程诱导多能干细胞非整合仙台病毒human peripheral blood mononuclear cellsreprogramminginduced pluripotent stem cellsnon-integratingsendai virus
分类号
R394.2
栏目名称
DOI
10.13602/j.cnki.jcls.2015.10.06
发布时间
2016-09-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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