换一批白念珠菌环介导等温扩增法的建立及其应用价值
Establishment and application of loop-mediated isothermal amplification for Candida albicans
摘要目的 建立一种简单快速检测白念珠菌的环介导等温扩增技术(LAMP),并评价其临床价值.方法 采用Primer Explorer5.0软件,针对白念珠菌RPSO基因设计4条引物,对LAMP反应体系和反应条件进行优化,评价检测特异性和检测限;收集123例外阴阴道念珠菌病(VVC)组和42例正常对照组的女性阴道拭子,平行进行真菌培养、LAMP检测、PCR检测、1.79 mol/L KOH镜检,真菌培养作为VVC诊断参考方法;组间检测方法阳性率的比较采用Pearson x2检验,LAMP、PCR、镜检与培养法的一致性采用Kappa检验,P＜0.05为差异有统计学意义;应用ROC曲线分析法评价LAMP、PCR在VVC诊断中的价值.结果 LAMP技术的最适反应温度为61℃,且特异性高,与其他常见菌株无交叉反应,检测限为103 copies/μL;VVC组和正常对照组的LAMP、PCR、镜检阳性率差异有统计学意义(LAMP,x2=68.576;PCR,x2=64.918;镜检,x2=50.076,P＜0.01).LAMP和PCR与培养法有较好的一致性(к=0.744,0.720),镜检与培养法一致性较差(к=0.533);LAMP对VVC的诊断敏感性为87.62％,特异性为88.33％,阳性预测值为92.93％,阴性预测值为80.30％.LAMP、PCR诊断VVC的ROC曲线下面积分别为0.873、0.888,两者的诊断效能差异无统计学意义(Z=0.849,P=0.395 6),但LAMP检测时间短于1h.结论 建立的检测白念珠菌的LAMP技术快速可靠、敏感性好、特异性高,综合筛查性能优于实验室常规方法,可用于白念珠菌感染的辅助诊断和疗效监控.
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医学主题词
诊断(Diagnosis)性(Sex)念珠菌病, 外阴阴道(Candidiasis, Vulvovaginal)方法(Methods)敏感性与特异性(Sensitivity and Specificity)
分类号
R446.5（诊断学）
栏目名称
DOI
10.13602/j.cnki.jcls.2019.01.02
发布时间
2019-03-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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