结核分枝杆菌Rv0309抗原的重组表达、纯化和鉴定
Recombinant Expression, Purification and Identification of Antigen Rv0309 of Mycobacterium Tuberculosis
摘要目的 重组表达结核分枝杆菌Rv0309蛋白,以进一步探讨其免疫效应.方法 将结核分枝杆菌抗原Rv0309的全长cDNA插入到原核表达载体pGEX-4T-1中,构建成Rv0309重组质粒.将重组质粒转人大肠杆菌BL21并以IPTG诱导表达,进一步经GST亲合层析柱纯化,经SDS-PAGE和Western-blot鉴定重组表达蛋白.结果 获得了pGEX4T-Rv0309重组子,并在大肠埃希菌BL21中诱导表达重组Rv0309蛋白,其条带大小约23 000,与预期结果相符.结论 成功地进行了结核分枝杆菌抗原Rv0309的基因克隆与重组表达,为进一步研制新型结核病疫苗打下了基础.
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