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RT-PCR方法分析益气养阴活血法对肺纤维化大鼠肺组织TGF-β1mRNA影响

Using RT-PCR to Analyze the Effect of the Invigorating Qi, Nourishing Yin and Activating Blood Circulation Method on Regulating TGF-β1mRNA in Pulmonary Fibrosis Rats

摘要目的:观察益气养阴法中药组方——抗纤合剂对博莱霉素诱导的肺纤维化大鼠肺组织中TGF-β 1mRNA蛋白质表达的影响,在分子层面探讨抗纤合剂的可能作用机制.方法:将健康雄性Wistar大鼠120只随机分为对照组、模型组、强的松组、抗纤合剂组.每组30只.除正常对照组,其他3组采用博莱霉素(BLM)致肺纤维化大鼠模型.模型建成后,强的松组以6.25 mg·kg-1的强的松溶液灌胃,抗纤合剂组以5 g·kg-1灌胃.正常对照组与模型组以等溶生理盐水灌胃,观察大鼠一般状态,分别于7、14、28d3个时间点处死大鼠并取材.每个时间点每组大鼠10只.取肺组织固定包埋切片后,应用病理图像分析系统对病理切片进行扫描,观察大鼠组织病理学改变,用HE染色观察肺组织肺泡炎变化程度,用胶原纤维的特异染色Masson染色观察肺组织纤维化变化程度;用RT-PCR方法,动态观察肺组织TGF-β 1 mRNA的表达.结果:HE染色及Masson染色显示:正常组肺内结构清晰,肺泡间隔未见增厚,模型组:各时期均表现有程度不等的肺泡炎,大量炎性细胞浸润,28 d时肺组织以胶原沉积为主,呈中、重度肺纤维化改变.强的松组、抗纤合剂组肺组织炎细胞浸润区域较模型组明显减少,28 d时胸膜和肺泡间隔胶原纤维沉积呈束状,显示轻、中度肺纤维化改变.除正常组外,其他各组TGF-β 1 mRNA表达于第7天明显增强,模型组14d达到高峰,其余两组与模型组相比,差异显著,强的松组、抗纤合剂组统计无明显差异.结论:以益气养阴活血法立方的抗纤合剂可降低BLM致肺纤维化大鼠肺组织炎症和肺纤维化程度,下调BLM致肺纤维化大鼠TGF-β 1 mRNA表达,对肺纤维化有一定的治疗作用.

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DOI 10.13194/j.issn.1673-842x.2019.10.005
发布时间 2019-12-05(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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