载体介导的RNA干扰技术抑制肝癌耐药细胞MDR1表达的研究-论文-万方医学网

载体介导的RNA干扰技术抑制肝癌耐药细胞MDR1表达的研究

Inhibition of MDR1 expression in hepatocellular carcinoma cell Bel-7402/R by vector-mediated RNA interference

导出在线阅读下载全文收藏纠错

摘要：

目的:构建含多药耐药基因MDR1的短发夹状RNA(short hairpinRNA,shRNA)表达质粒,观察对肝癌耐药细胞Bel-7402/R的MDR1 mRNA的抑制作用.方法:利用分子克隆技术,将含MDR1的双链DNA,与经双酶切后的载体PGE-1连接,构建pshRNA MDR1重组质粒,在脂质体的介导下转染肝癌耐药细胞株Bel-7402/R;RT-PCR分析MDR1 mRNA的表达,MTT法检测细胞对药物的敏感性,流式细胞仪检测细胞内罗丹明123(Rh123)的潴留和P-gp的表达.结果:PCR和DNA测序证实了表达质粒构建成功,并能明显地抑制MDR1 mRNA的表达;对盐酸表柔比星和顺铂的半数抑制浓度IC50明显降低,P＜0.05;P-gp的表达阳性率降低了57.3%;细胞内Rh123的浓度显著增高,P＜0.05.结论:构建的pshRNA-MDR1表达质粒能有效地降低肝癌耐药细胞MDR1 mRNA和P-gp的表达.

作者：胡礼仪 ^[1] 周新 ^[2] 张有顺 ^[1] 戴宗晴 ^[1] 黄玲 ^[1] 王菊 ^[1]

作者单位：郧阳医学院附属东风医院肝脏外科研究所,湖北,十堰,442008 ^[1] 武汉大学中南医院检验科,湖北,武汉,430071 ^[2]

期刊：《肿瘤防治杂志》2004年11卷11期 1158-1162页 ISTICPKU

关键词：基因,MDR 基因表达 RNA 肝肿瘤

主题词：肝肿瘤(Liver Neoplasms)细胞(Cells)基因(Genes)研究(Research)基因表达(Gene Expression)

分类号： R737.9

栏目名称： 基础·临床研究

DOI： 10.3969/j.issn.1673-5269.2004.11.012

发布时间： 2004-12-16

基金项目：

湖北省卫生厅科研项目 湖北省教育厅科研项目

浏览：184
被引：19
下载：0

相似文献

中文期刊
外文期刊
学位论文
会议论文

检索历史清除