摘要目的 观察褪黑素对糖尿病合并脑缺血再灌注损伤(CIRI)小鼠脑组织损伤的预防作用,并探讨其作用机制与SIRT1-BMAL1通路介导的自噬的关系.方法 取健康雄性C57BL/6小鼠24只,采用腹腔注射STZ的方法建立糖尿病模型,将糖尿病小鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、缺血再灌注+褪黑素组、缺血再灌注+褪黑素+SIRT1抑制剂组,每组各6只.假手术组分离大脑中动脉但不阻断;缺血再灌注组采用MCAO法建立脑缺血再灌注模型;缺血再灌注+褪黑素组采用MCAO法建立脑缺血再灌注模型,于缺血即刻和再灌注前腹腔注射褪黑素10 mg/kg;缺血再灌注+褪黑素+SIRT1抑制剂组于MCAO术前5、3、1 d腹腔注射SIRT1抑制剂5 mg/kg,采用MCAO法建立脑缺血再灌注模型,于缺血即刻和再灌注前腹腔注射褪黑素10 mg/kg.于再灌注24 h后处死各组小鼠,取脑组织,采用HE染色法观察脑组织病理变化,TTC染色法检测脑梗死体积,Western blotting法检测脑组织SIRT1-BMAL1通路相关蛋白SIRT1、BAML1、ac-BMAL1和自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin1、Atg14表达.结果 与假手术组相比,缺血再灌注组脑组织神经元数量减少,胞质疏松并伴有空泡形成,缺血再灌注+褪黑素组上述改变较缺血再灌注组减轻,缺血再灌注+褪黑素+SIRT1抑制剂组上述改变较缺血再灌注+褪黑素组加重.与假手术组相比,缺血再灌注组脑梗死体积增加(P<0.05),缺血再灌注+褪黑素组脑梗死体积较缺血再灌注组减少(P<0.05),缺血再灌注+褪黑素+SIRT1抑制剂组脑梗死体积较缺血再灌注+褪黑素组增加(P<0.05).与假手术组相比,缺血再灌注组脑组织LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin1、Atg14及SIRT1、BAML1表达降低,ac-BMAL1表达增加(P均<0.05);与缺血再灌注组相比,缺血再灌注+褪黑素组LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin1、Atg14及SIRT1、BAML1表达增加,ac-BMAL1表达降低(P均<0.05);与缺血再灌注+褪黑素组相比,缺血再灌注+褪黑素+SIRT1抑制剂组LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin1、Atg14及SIRT1、BAML1表达降低,ac-BMAL1表达增加(P均<0.05).结论 褪黑素能够预防糖尿病合并CIRI小鼠脑组织损伤,保护脑神经;其机制可能是通过调控SIRT1-BMAL1通路介导的自噬增强来发挥作用.