摘要目的 通过伪狂犬病毒(pseudorabies virus,PRV)示踪技术结合钙成像技术,研究排便反射的高级中枢定位及相关神经通路.方法 研究将成年SD大鼠分为实验组和对照组,实验组大鼠在直肠壁内注射编码荧光蛋白的PRV病毒,对照组大鼠则注射空载体病毒.注射5 d后,处死大鼠并取出直肠和大脑组织进行荧光定量分析.使用基因编码的钙离子指示剂(如GCaMP)结合活体钙成像技术,观察排便活动相关神经元的钙信号动力学变化.结果 实验组大鼠的下丘脑可观察到逐渐增强的荧光信号,通过图形分析可明确椎体神经元是直肠的上游突触连接神经元,通过活体钙成像技术可进一步明确排便活动时下丘脑区域的神经元钙信号明显上升.结论 本研究初步明确了大鼠排便反射的定位中枢,并通过伪狂犬病毒示踪技术和钙成像技术,动态观测到排便活动时相关中枢神经元的显著电活动信号.
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