转染Smad 7基因的大鼠肾小球系膜细胞对Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的改变
Changes of type Ⅰ, Ⅲ collagen expression in cultured rat glomerular mesangial cells transfected with Smad 7 cDNA
目的 探讨Snmd 7基因对大鼠肾小球系膜细胞(MsC)Ⅰ、Ⅲ型胶原(col工、ColⅢ)表达的影响,为试图运用Smad 7对肾纤维化进行基因治疗提供实验依据.方法 经脂质体介导将含有Smad 7重组表达质粒转染大鼠MsC,用G418筛选及Northern blot、Western blot法鉴定;又分别采用RT-PCR和Western blot法,检测转染阳性MsC克隆Col Ⅰ、Col Ⅲ表达改变.结果 成功建立稳定高表达Smad 7的阳性MsC克隆(S-22与S-26),并证实两阳性MsC克隆ColⅠ及Col Ⅲ mRNA及蛋白的表达均被明显抑制,其中S-22克隆COl Ⅰ及ColⅢ mRNA表达分别降低47%和56%,其蛋白表达分别降低65%和54%.结论 Smad 7可能通过抑制组织内Col Ⅰ及Col Ⅲ的生成而起到减轻肾纤维化进展的作用.
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