换一批血清肌酐二步酶法检测新技术研究
Investigation on the new two-step enzymatic method for the detection of serum creatinine
摘要目的 探讨二步酶法测定肌酐的实验方法.方法 以肌酐酰氨基水解酶为试剂Ⅱ,以N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲氧基苯胺钠盐(HDAOS)和4-氨基安替比林(4-AAP)色原物作为试剂Ⅰ,建立二步酶法测定血清肌酐.通过内空白法消除内源性肌酸和改变光谱吸收方法消除脂血、溶血、黄疸干扰.采用二步酶法测定36例患者血清肌酐,并与高效液相色谱(HPLC)法和一步酶法比较;同时测定200名健康体检者血清肌酐,以建立参考范围.结果 患者组肌酐二步酶法结果[(84.2±26.6) μmol/L]明显低于一步酶法[(116.6±29.6) μmol/L,t＝32.12,P<0.01];与HPLC法测定结果[(83.9±26.8)μmol/L]差异无统计学意义(t＝0.541 6,P>0.05),且呈良好相关性(Y二步酶法＝1.042XHPLC法-0.182 1,r2＝0.982 4).二步酶法测定血清肌酐的线性范围达4 500 μmol/L,平均回收率为100.8%,批内和批间变异系数(CV)分别为2.91%～4.20%和3.20%～4.60%,应用二步酶法每天测定室内质控定值血清[低(78.0 μmol/L)、中(206.0 μmol/L)、高(900.0 μmol/L)],共测定180 d,其日间总CV分别为4.46%、5.27%、7.24%.二步酶法试剂至少能稳定180 d.健康人群血清肌酐的参考范围男性为56～132 μmol/L,女性为41～109 μmol/L.结论 以肌酐酰氨基水解酶为试剂Ⅱ和以HDAOS、4-AAP为色原物(试剂Ⅰ)的二步酶法可以消除肌酸和脂血、溶血、黄疸血的干扰,可用于临床肌酐常规测定.
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