基于免疫磁分离的7种产志贺毒素大肠埃希氏菌快速检测方法的评价

Evaluation of the rapid detection method for 7 kinds of Shiga toxin-producing Escherichia coli based on immunomagnetic separation

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摘要目的评价基于免疫磁分离(immunomagnetic separation,IMS)的7种产志贺毒素大肠埃希氏菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli,STEC)快速检测方法的灵敏度与特异性.方法将大肠埃希氏菌O157︰H7和大肠埃希氏菌O103不同稀释度的菌悬液用免疫磁珠富集后,检测其携带毒力基因stx1、stx2和黏附基因eae以及O157︰H7和O103的抗原基因.同时,对菌悬液进行活菌计数,进行灵敏度研究.对8株携带stx1、stx2、eae基因的目标菌菌悬液和25株非目标菌的标准菌株及分离菌株的菌悬液用免疫磁珠富集后,检测其携带毒力基因stx1、stx2和黏附基因eae以及抗原基因,进行特异性研究.结果本方法检测大肠埃希氏菌O157︰H7的stx1、stx2、eae以及抗原基因的灵敏度为102 CFU/mL,检测大肠埃希氏菌O103抗原基因的灵敏度为103 CFU/mL.8株目标菌检测结果与其携带的基因一致,没有假阴性,包容性达到100％.25株非目标菌检测结果与其携带的基因一致,未发现有假阳性,排他性达到100％.结论该方法具有良好的灵敏性及特异性,适用于食品中7种产志贺毒素大肠埃希氏菌的快速检测.