换一批草甘膦单克隆抗体的制备及酶联免疫分析方法的建立
Preparation of glyphosate monoclonal antibody and establishment of an enzyme linked immunosorbent assay
摘要目的 制备出草甘膦(glyphosate,GLY)单克隆抗体,建立间接竞争酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)快速检测茶叶中GLY的方法.方法 首先合成GLY完全抗原(包被原和免疫原),通过免疫小鼠成功制备出 GLY 单克隆抗体.根据 ELISA 的检测流程,采用棋盘法确定最佳包被抗原和抗体的稀释倍数,确定最佳包被的温度和时间,并确定最佳加入一抗、二抗后反应时间,建立检测方法并对其性能进行评价.结果 GLY包被抗原和抗体的稀释倍数为1:2000,包被温度为37℃、包被时间为90 min,加入一抗、二抗后反应时间为 60 min.该方法的线性方程为 Y=-0.2353X+0.6539(r2=0.9871),半抑制浓度(50%inhibiting concentration,IC50)为4.508 ng/mL,检出限为1.18 ng/mL.变异系数均在10%以下,与异菌脲、多菌灵、三唑磷、甲基对硫磷、噻菌灵这 5 种标准品的交叉反应率均低于 0.03%,在茶叶中加标回收率为 90.86%～110.35%,且相对标准偏差均小于10%.结论 该方法具有较高的灵敏度和特异性,可用于茶叶样本中GLY残留的快速检测.
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关键词
草甘膦完全抗原单克隆抗体间接竞争酶联免疫分析法glyphosatecomplete antigenmonoclonal antibodyenzyme linked immunosorbent assay
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2023-09-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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