换一批鼠伤寒沙门氏菌CRISPR/Cas12a检测方法的建立与应用
Establishment and application of CRISPR/Cas12a assay for the detection of Salmonella typhimurium
摘要目的 建立快速、超灵敏检测食品中鼠伤寒沙门氏菌的方法.方法 根据鼠伤寒沙门氏菌fliC基因保守片段设计并合成特异性CRISPR RNA(crRNA),并根据crRNA所在的基因序列区域设计重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)特异性引物,利用RPA技术扩增样本核酸,并对扩增产物进行CRISPR/Cas12a 荧光检测.结果 该检测方法克服了传统鼠伤寒沙门氏菌检测方法的缺陷,耗时短且具有较高的灵敏度,对鼠伤寒沙门氏菌的检出限低至 1 copy/μL,与乙型副伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、单增李斯特菌、阪崎肠杆菌、大肠埃希氏菌等常见食源性致病菌核酸检测无交叉反应,且建立的方法在检测人工污染的食品样品时具有较高的灵敏度和准确性.结论 本研究建立的检测方法耗时短、灵敏度高,可用于鼠伤寒沙门氏菌的快速检测.
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关键词
CRISPR/Cas12a重组酶聚合酶扩增鼠伤寒沙门氏菌快速检测CRISPR/Cas12arecombinase polymerase amplificationSalmonella typhimuriumrapid detection
栏目名称
DOI
10.19812/j.cnki.jfsq11-5956/ts.20240302003
发布时间
2024-07-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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