多重实时荧光定量聚合酶链式反应在芝麻酱掺假鉴别中的应用
Application of multiplex real-time polymerase chain reaction for adulteration identification in sesame sauce
摘要目的 研究基于分子生物学技术,建立多重实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术检测芝麻酱中的植物源性成分,实现芝麻酱的快速掺假鉴别,突破单标准单物种检测的局限性.方法 该研究以芝麻 2S albumim mRNA基因、花生Ara b2 基因、大豆Lectin基因、玉米adh1 基因设计特异性引物和探针,优化反应体系,建立多重实时荧光定量 PCR技术检测芝麻酱中的芝麻源性成分、花生源性成分、大豆源性成分、玉米源性成分,并应用于市售的芝麻酱样本检测分析.结果 该方法高效低成本,特异性好,对小米、绿豆等 10 种非目标源性成分无特异性扩增;对芝麻源性成分、花生源性成分、大豆源性成分、玉米源性成分的最低检出限为 100 pg/μL,具有较高的灵敏度;应用建立的方法,对市售 21 份芝麻酱样本进行检测分析,检测结果与标签标注不符合的有 4份,标签标注符合率为 80.95%,与参比方法检测结果一致.结论 建立的多重实时荧光定量PCR技术对加工成品的检测具有较好的适用性,为芝麻酱的掺假鉴别提供了一种新的分子生物学方法.
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