换一批叠氮溴化丙锭结合实时定量聚合酶链式反应法快速检测玫瑰酱中戊糖片球菌活菌
Rapid detection of viable Pediococcus pentosaceus in rose jam by propidium monoazide-quantitative real-time polymerase chain reaction method
摘要目的 探究基于叠氮溴化丙锭(propidium monoazide,PMA)与实时定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qPCR)技术联用,建立一种快速检测玫瑰酱中戊糖片球菌活菌的方法.方法 根据特异性基因murI设计戊糖片球菌特异性引物,通过优化PMA浓度、暗孵育时间和曝光时间,确定最佳PMA处理条件,并通过PMA-qPCR方法验证不同比例的戊糖片球菌死菌/活菌混合菌液,评估该方法的灵敏度和检出限.结果 设计的引物具有良好的特异性,PMA的最佳处理条件为质量浓度80 μg/mL,暗孵育时间为15 min,曝光时间为25 min,此条件下,构建的标准曲线相关系数(r2)为0.9983,最低检出限为3.98×103 CFU/g.结论 本研究建立的PMA-qPCR方法可有效实现玫瑰酱中戊糖片球菌活菌数的快速检测,灵敏度高,为复杂食品基质中微生物的定量检测提供了技术支持.
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关键词
玫瑰酱戊糖片球菌叠氮溴化丙锭实时定量聚合酶链式反应活菌rose jamPediococcus pentosaceuspropidium monoazidequantitative real-time polymerase chain reactionviable
栏目名称
DOI
10.19812/j.cnki.jfsq11-5956/ts.20250110007
发布时间
2025-07-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
中央引导地方科技发展资金项目（YDZX2023081）
海关总署科研项目（2024HK014）
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