换一批枯草芽孢杆菌木聚糖酶的克隆表达及其酶解两种木聚糖的产物分析
Cloning and Expression of Bacillus subtilis Xylanase and Determination of Hydrolysis Products of Two Different Xylans by It
摘要通过基因克隆方法获得枯草芽孢杆菌木聚糖酶XynA,考察经镍离子亲和柱纯化后的XynA分别在桦木木聚糖和毛榉木木聚糖中的酶解情况,利用薄层色谱法(thin layer chromatography,TLC)及基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF/MS)法鉴定木聚糖酶XynA的酶解产物.运用MALDI-TOF/MS分析枯草芽孢杆菌木聚糖酶XynA酶解桦木木聚糖和毛榉木木聚糖产物不同的聚合度寡糖的分布情况.结果表明:在桦木木聚糖酶解液中,产生的中性木寡糖主要为木二糖(X2)和木三糖(X3),酸性木寡糖聚合度为4～12,并且每一个酸性木寡糖上仅连接着一个甲基葡萄糖醛酸侧链(MeG).在毛榉木木聚糖酶解液中,产生的中性木寡糖与在桦木木聚糖酶解液中相同,酸性木寡糖的结构相似,聚合度为4～16.因此木聚糖酶XynA具有生产木二糖(X2)和木三糖(X3)以及酸性木寡糖(MeGXn)的功能.
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关键词
木聚糖内切酶低聚木糖基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱xylanasexylooligosaccridesmatrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOF/MS)
分类号
Q819
栏目名称
DOI
10.7506/spkx1002-6630-201605020
发布时间
2016-04-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金面上项目（31170607）
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