换一批蔗糖磷酸化酶的异源表达及合成蜜二糖条件优化
Heterologous Expression of Sucrose Phosphorylase For Synthesis Melibiose Condition Optimization
摘要为挖掘蔗糖磷酸化酶(sucrose phosphorylase,SPase)合成蜜二糖的潜力、降低蜜二糖制备的工业成本,该研究利用大肠杆菌对SPase基因进行异源表达,通过镍柱纯化后表征其酶学性质,采用响应面试验优化合成蜜二糖的最佳反应条件,成功将芒果源肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)的SPase基因在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,获得可溶性SPase.酶学性质研究结果表明其比酶活为 78 U/mg,最适反应温度和pH值分别为 40℃和 6.0.以此为基础利用SPase进行蜜二糖的合成优化,结果表明,在 40℃条件下,添加 200 g/L蔗糖、400 g/L D-半乳糖和 390 U/L的SPase,反应 24h最高可获得浓度为(34.20±0.92)g/L的蜜二糖.
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关键词
蔗糖磷酸化酶(SPase)基因克隆基因表达功能性低聚糖蜜二糖sucrose phosphorylase(SPase)gene cloninggene expressionfunctional oligosaccharidemelibiose
栏目名称
DOI
10.12161/j.issn.1005-6521.2024.16.023
发布时间
2024-09-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
广东省重点领域研发计划项目（2022B0202050002）
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