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土壤微生物RAPD分析体系的优化研究

Optimization of RAPD conditions for soil microbes

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学术成果认领

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摘要采用正交实验设计,对影响土壤微生物RAPD扩增体系的Mg2+、dNTP浓度及引物浓度进行了研究,同时对退火温度、延伸时间及循环次数进行摸索.结果表明,适宜土壤微生物PCR扩增反应在25 μ1体积中进行,包括7 ng土壤微生物DNA样品、20 pm随机引物、1.5 u Taq酶、3.0 mmo·L-1 MgCL2和0.2 mmo1·L-1dNTP.PCR扩增反应进程如下:94℃3 min,使土壤DNA变性;然后再进行39个循环,每个循环包括94℃1 min,37℃40 s,72℃90 s,结束后72℃延伸7 min.

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作者焦晓丹 ^[1] 吴凤芝 ^[1] 高海军 ^[2] 学术成果认领

作者单位东北农业大学园艺系,哈尔滨,150030 ^[1] 建三江大兴农场,建三江,156303 ^[2]

关键词土壤微生物 RAPD反应体系优化

主题词土壤(Soil)研究(Research)研究设计(Research Design)温度(Temperature)时间(Time)

分类号 S512

发布时间 2005-09-01

基金项目

国家自然科学基金（30230250）；黑龙江省自然科学基金（C0215）

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2005年24卷8期

921-924页

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