换一批Rac1/MAPK/ERK通路介导脂多糖LPS诱导的人内皮细胞单层通透性增高机制研究
LPS Regulates the Enhancement of HUVEC Permeability Mediated by Rac 1-MAPK/ERK Signal Pathway
摘要目的:探讨LPS诱导的人内皮细胞单层通透性改变的分子机制.方法:应用逆转录病毒为载体,感染并筛选稳定表达持续活化型Rac1和主导抑制型Rac1的人HUVEC细胞,应用LPS刺激并观察细胞骨架蛋白F-actin和HUVEC单层通透性的改变.同时应用Western blot方法检测LPS刺激前后细胞中MAPK/ERK信号通路的改变及加入PD98059阻断ERK表达后,细胞内F-actin的改变情况 .结果:与正常HUVEC相比较,LPS刺激后,感染活化型Rac1和主导抑制型Rac1的HUVEC中F-actin重构并形成大量应力纤维,细胞单层通透性显著增加.而抑制型Rac1感染后的HUVEC中F-actin无重构现象,同时细胞单层通透性无明显增加.LPS刺激前后,各组细胞中ERK1/2总蛋白均无明显改变.LPS刺激后,感染活化型Rac1的HUVEC中,p-ERK增加.经PD98059阻断后,细胞内p-ERK表达下降同时伴随F-actin解聚发生.结论:LPS诱导的内皮细胞通透性增加是经过Racl-MAPK/ERK通路介导的.
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