换一批人清道夫受体AII胞外部分在毕赤酵母(Pichia pastoris)中的分泌表达
Secretory Expression of Extracellular Domains of Human Scavenger Receptor Class A Type Ⅱ in Pichia pastoris
摘要清道夫受体A(SR-A)介导巨噬细胞无限制摄取修饰的低密度脂蛋白(mLDL)形成泡沫细胞,继而形成动脉粥样硬化病灶,在动脉粥样硬化的发生、发展过程中具有重要作用,被认为是治疗动脉粥样硬化的潜在靶点.本文应用RT-PCR方法扩增得到编码人Ⅱ型SR-A胞外部分(shSR-AII)的cDNA,将其克隆至毕赤酵母(Pichia pastoris)分泌表达载体pPIC9K构建重组表达质粒p9K-shSR-AII.将重组表达质粒线性化后,电转化毕赤酵母GS115,用原位双膜法筛选获得高表达shSR-AII的重组菌株GS115/p9K-shSR-AII.重组菌株经1%甲醇诱导,SDS-PAGE、Western blot分析表明shSR-AII获得了分泌表达.Ligand binding blot结果表明表达的shSR-AII具有与配基oxLDL结合的生物活性.U937泡沫细胞模型进一步表明shSR-AII可通过竞争性结合oxLDL来抑制泡沫细胞的形成,为以shSR-AII为靶点建立抗动脉粥样硬化药物筛选模型奠定了基础.
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DOI
10.3321/j.issn:1000-3061.2004.06.011
发布时间
2004-12-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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