摘要L-缬氨酸是重要的必需支链氨基酸,广泛应用于饲料、医药、食品等领域.目前相对较低的生产强度和转化率依然是限制L-缬氨酸大规模生产的关键因素.为提高L-缬氨酸的生产性能,本研究以实验室保藏的能够生产 L-缬氨酸的谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)为出发菌株进行系统代谢工程改造.首先,通过强化 L-缬氨酸的前体供应、合成途径和转运系统获得菌株VH-9,在 5 L发酵罐上L-缬氨酸产量、产率和生产强度分别为 76.6 g/L、0.45 g/g和 2.39 g/(L·h).进一步通过增强底物葡萄糖的摄取、平衡能量供给以降低琥珀酸的积累,获得菌株 VH-18,L-缬氨酸产量、产率和生产强度分别提高到82.7 g/L、0.52 g/g和2.58 g/(L·h);经过发酵工艺条件优化,使菌株VH-18 的L-缬氨酸产量、转化率和生产强度进一步提高到 88.7 g/L、0.54 g/g和 2.77 g/(L·h).本研究通过系统代谢工程策略,实现了L-缬氨酸的高效生产.
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