猪流行性腹泻抗原基因在乳酸菌中的表达及优化
Expression and Optimization of Porcine Epidemic Diarrhea Virus Gene in Lactococcus lactis
摘要目的:优化猪流行性腹泻抗原基因COE在乳酸乳球菌中的表达.方法:将表达猪流行性腹泻抗原基因COE的重组乳酸菌活化,酶切鉴定其稳定性,然后设计实验分别从pH值、温度、Nisin浓度、诱导时间、菌体密度等条件对COE表达进行优化,SDS-PAGE检测表达效果.结果:COE在乳酸乳球菌中的最佳表达条件为pH 7.0、T(温度)=30℃、Nisin=2ng/mL、t(诱导时间)=4h和OD_(600)=0.5,在以上条件下相对表达量分别达到了15.48%、15.05%、15.82%、14.72%和20.47%.在最佳表达条件下得到SOE的相对表达含量达到21%.结论:COE重组质粒稳定,其在乳酸菌中经优化表达后可为今后研制猪流行性腹泻乳酸菌疫苗提供数据.
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