换一批伊马替尼联合 P27基因克隆对慢性粒细胞白血病 K562细胞的作用
Effect of imatinib combined with P27 gene clone on chronic myeloid leukemia cell line K562
摘要目的:探讨伊马替尼和 P27基因克隆联合作用对 K562细胞的细胞增殖、细胞周期及凋亡等的调控作用.方法:RT- PCR扩增 P27基因,胶纯化回收后连接到 T载体测序,序列正确后构建 P27- pcDNA3.1载体,将 P27- pcDNA3.1与空载体分别以脂质体转染入 P27基因缺失的 K562细胞,经筛选得到 G418抗性的 K562细胞株,Western blot证实转染后有 P27蛋白表达,MTT法检测细胞生长指数和细胞存活率,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡.结果:表达外源性 P27蛋白的 P27- pcDNA3.1- K562细胞株生长速度明显慢于对照 K562细胞株,流式细胞仪显示 G0/G1期细胞增多,S期细胞明显减少,P27- pcDNA3.1- K562细胞与伊马替尼联合应用后凋亡细胞比例明显上升,MTT法显示细胞存活率较 P27- K562细胞组及伊马替尼-K562细胞组均明显下降(P＜ 0.01 vs P27- K562 细胞组,P＜ 0.05 vs 伊马替尼-K562 细胞组 ).结论:表达外源 P27蛋白联合应用伊马替尼对抑制 K562细胞增殖及促凋亡方面具有协同作用.
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