换一批p16基因克隆联合伊马替尼对慢性粒细胞白血病K562细胞作用的研究
Effect of p16 gene cloning combined with imatinib on chronic myeloid leukemia K562 cell line
摘要目的:探讨p16基因克隆联合伊马替尼对慢性粒细胞白血病细胞株K562细胞的增殖、周期及凋亡等的调控作用.方法:RT-PCR扩增p16基因,胶纯化回收后连接到T载体测序,序列正确后构建p16-pcDNA3.1载体,将p16-pcDNA3.1与空载体分别以脂质体转染入p16基因缺失的K562细胞,经筛选得到G418抗性的K562细胞株,Western blot证实转染后有p16蛋白表达,MTT法检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡.结果:反复测序发现,从K562细胞中扩增的DNA片段属于非特异性扩增,证实K562细胞中p16基因缺失.转染p16基因后表达外源性p16蛋白的p16-pcDNA3.1-K562细胞株生长速度明显减慢;伊马替尼作用于已转染p16-pcDNA3.1的K562细胞,其细胞存活率与伊马替尼作用未转染K562细胞及单纯转染p16-pcDNA3.1的K562细胞相比均明显降低.转染p16基因后GO/G1期细胞增多,S期细胞明显减少,p16-peDNA3.1-K562细胞与伊马替尼联合应用后凋亡细胞比例明显上升.结论:p16基因抑制K562细胞增殖并调节其周期.外源p16联合应用伊马替尼对抑制K562细胞增殖及促凋亡方面具有协同作用.
更多相关知识
- 浏览265
- 被引1
- 下载1
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
