摘要目的 观察松郁安神方对失眠模型大鼠睡眠结构以及原代培养DRN5-HT能神经元兴奋性的影响,探讨其对失眠模型大鼠的治疗作用及机制.方法 50只雄性SD大鼠随机分为模型组、松郁安神方组、艾司唑仑组、唑吡坦组和曲唑酮组,每组10只.松郁安神方组、艾司唑仑组、唑吡坦组和曲唑酮组大鼠分别给予15.9g/(kg·d)松郁安神方、0.1mg/(kg·d)艾司唑仑、1mg/(kg·d)唑吡坦和10.3mg/(kg·d)曲唑酮灌胃,模型组给予等体积生理盐水灌胃,连续14d.五组大鼠末次灌胃30min后采用电刺激法建立失眠动物模型.通过对各组大鼠脑电和肌电电极的埋藏及信号采集,进行睡眠结构分析.体外培养大鼠原代DRN 5-HT能神经元,采用免疫荧光法鉴定,分别加入模型组和松郁安神方组脑脊液,运用全细胞膜片钳实验技术记录两组原代培养DRN5-HT能神经元的内在膜特性(包括静息膜电位和膜输入阻抗),电流诱发动作电位特征属性(包括阈值电位、幅度、超极化后电位幅度、半幅时程、上升速率和下降速率)和发放频率.结果 与模型组比较,松郁安神方组可以缩短失眠大鼠睡眠潜伏期(SOL)(P＜0.01),延长总睡眠时间(TST)(P＜0.01).在睡眠结构上主要表现为延长慢波睡眠(SWS)和快速动眼睡眠(REMS)(P均＜0.01).与松郁安神方组比较,艾司唑仑组、唑吡坦组和曲唑酮组均可缩短SOL(P均＜0.01),艾司唑仑组、唑吡坦组可延长TST(P均＜0.01),而曲唑酮组对TST影响不大(P＞0.05),艾司唑仑组、唑吡坦组和曲唑酮组均可延长非快速动眼睡眠(NREMS),缩短REMS(P＜0.05和P＜0.01),但艾司唑仑组和唑吡坦组主要表现为延长快波睡眠(LS),减少SWS(P均＜0.01),而曲唑酮组则表现为延长SWS(P＜0.01),对LS几乎不产生影响(P＞0.05).与模型组相比,松郁安神方组5-HT能神经元静息膜电位(RMP)和膜输入阻抗(Rin)均明显降低(P均＜0.01),电流诱发动作电位的阈值电压提高(P＜0.05),动作电位的幅度、上升速率以及下降速率均降低(P＜0.05和P＜0.01),而超极化后电位幅度和半幅时程两组比较差异无统计学意义(P均＞0.05).与模型组相比,松郁安神方组亦能降低电流诱发的5-HT能神经元动作电位发放的频率(P＜0.01).结论 松郁安神方可缩短SOL,延长TST.在睡眠结构上主要表现为延长SWS和REMS,在改善REMS以及恢复正常的睡眠结构方面具有明显优势,其改善睡眠的作用机制可能与抑制DRN5-HT能神经元兴奋性有关.