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基于VEGF-C/VEGFR-3信号通路电针预处理促淋巴管再生修复淋巴水肿的作用机制研究

Effect of electroacupuncture pretreatment on mediating VEGF-C/VEGFR-3 signaling pathway to promote lymphatic vessel regeneration and repair lymphedema

摘要目的观察电针预处理足三里联同阴陵泉穴对淋巴管内皮细胞(lymphatic endothelial cells,LECs)增殖、迁移、小管形成等生物学行为的影响及其相关效应及机制,为淋巴管再生治疗淋巴水肿提供理论依据,探讨电针预处理对淋巴水肿的修复作用可能机制.方法 SD大鼠随机将其分为空白组、假手术组、模型组、连续波电针组、疏密波电针组,每组10只.假手术组具体操作与模型组同,但不进行淋巴管结扎以及淋巴结摘除,模型组和电针组先将左侧腹股沟皮肤沿圆周切开,然后连同周围的脂肪垫同腹股沟淋巴结一起切除,用10-0尼龙线将染色的淋巴管在结扎前和结扎后区域仔细缝合,并用周围的脂肪垫完全切除及摘掉胭窝淋巴结.电针组选取双侧"足三里穴、阴陵泉穴"进行电针干预,每次20min,每日1次,造模前连续干预7d.HE染色观察大鼠损伤近端皮肤形态及结构的病理改变;免疫组织化学法检测术后7d大鼠腿部损伤远端组织LYVE-1阳性淋巴管并进行计数;WB技术检测大鼠腿部损伤远端组织的、VEGFR3、VEGF-C、LY-VE-1及IL-6的蛋白表达;PCR技术检测大鼠腿部损伤远端组织的VEGFR3、VEGF-C、LYVE-1的mRNA表达;ELISA技术检测血液中IL6、TNF-a水平表达情况.结果与假手术组比较,模型组大鼠术后LYVE-1、VEGF-C、VEG-FR3表达及IL-6的表达升高(P＜0.05).与模型组比较,电针组大鼠VEGFR3、VEGF-C、LYVE-1表达升高,IL-6表达降低(P＜0.05).结论电针预处理可能通过增加LYVE1、VEGF-C、VEGFR3表达,降低IL-6等炎性反应,促进病变组织内淋巴管生成,修复受损的淋巴循环.