换一批摘要目的:探索乳酸杆菌携带表达hCGβ避孕疫苗的抗生育作用.方法:用PCR从短小乳酸杆菌染色体中扩增得到S-层蛋白的信号肽序列,将其与hCGβ基因连接后克隆到乳酸杆菌整合型表达载体pIlac的lac启动子下游,得到质粒pIlac hCGβ,电穿孔转化干酪氏乳酸杆菌Lb. casei CECT5276.挑选转化后的耐药菌落,在含红霉素培养基中培养,抽提其染色体DNA,PCR及测序鉴定证实hCGβ基因整合到Lb. casei的基因组中.hCG放免检测上清及细胞裂解液中的hCGβ.结果:hCGβ基因已经整合到Lb. casei的基因组中;细菌产生的目的蛋白约有3/4分泌进入培养上清,而加入诱导剂乳糖21 h后,上清中的蛋白浓度达到峰值,为440 mIU/mL.重组菌在无选择压力条件下培养50代后仍可分泌hCGβ.结论:hCGβ在乳酸杆菌中得到了稳定的、分泌性的表达.
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分类号
R392.3（医学免疫学）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.0253-357X.2003.03.001
发布时间
2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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