1.3倍体HBV YIDD变异株真核表达载体构建及鉴定
Construction and Identification of Eukaryotic Expression Vector of 1.3 Ploid HBV YIDD Mutant Strain
摘要构建HBV YIDD拉米夫定耐药株1.3倍全基因真核表达载体,为进一步探讨乙肝病毒变异株的生物学特性及筛选抗病毒药物奠定基础.参考GenBank HBV序列设计并合成一系列引物,以临床证实为拉米夫定耐药的病人HBV DNA为模板,通过PCR扩增得到HBV全基因组并克隆至pGEM-T Easy载体中,经测序证实聚合酶基因存在YIDD变异,然后以该病人的HBV全基因组为模板构建 1.3 倍全基因HBV-YIDD变异真核表达载体pcDNA3.1(+)-1.3HBV.通过PCR扩增,酶切及测序证明pcDNA3.1(+)-1.3 HBV表达载体构建成功,该表达载体的构建为后期建立稳定表达HBV-YIDD变异的细胞模型提供材料.
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