大黄鱼肌肉生长抑制素-1前肽原核表达、多克隆抗体制备和功能验证
Large Yellow Croaker MSTN-1 Prodomain Prokaryotic Expression,Polyclonal Antibody Preparation and Antibody Function Identification
摘要肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)在动物肌肉的生长和发育过程中起着重要作用.该研究通过RT-PCR从大黄鱼(Larimichthys crocea)肌肉组织中克隆肌肉生长抑制素-1前肽基因(MSTN-1pros),构建了表达大黄鱼生长抑制素前肽的重组质粒,并在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达,获得了大黄鱼MSTN-1pros融合蛋白.用分离的重组蛋白免疫大白兔,制备了抗大黄鱼MSTN-1pros的多克隆抗体.经蛋白免疫印迹法检测,确定获得的抗体具有较高的特异性.通过对大黄鱼幼鱼的注射实验,发现注射过MSTN-1pros抗体的大黄鱼增重率比对照组降低了20.71%(P<0.05),证明MSTN前肽抗体对大黄鱼的生长具有抑制作用.实验结果表明,MSTN前肽蛋白可以用于养殖鱼类的生长调控.
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