换一批抗棉铃虫Ⅳ型几丁质酶(HaCHT4)小鼠多克隆抗体的制备与鉴定
Preparation and identification of anti-HaCHT4 mouse polyclonal antibody
摘要目的 原核表达棉铃虫Ⅳ型几丁质酶(HaCHT4)并制备其多克隆抗体.方法 在大肠杆菌中表达组蛋白-HaCHT4融合蛋白(His-HaCHT4),镍柱纯化目的蛋白,经足垫加皮下注射免疫小鼠.4次免疫后,用ELISA检测抗His-HaCHT4多克隆抗体的效价,Western blot法检测其免疫特异性.结果 成功纯化His-HaCHT4融合蛋白,小鼠抗His-HaCHT4的多克隆抗体的滴度高于1∶204 800.Western blot结果显示该抗体能与His-HaCHT4融合蛋白及棉铃虫体中的天然HaCHT4结合,但不能与黄粉虫的蛋白结合.结论 成功原核表达和纯化了His-HaCHT4,制备了特异性的鼠多克隆抗体.
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