龙胆苦苷调节SDF-1/CXCR4信号通路对人骨髓间充质干细胞成骨分化的影响
The effect of gentiopicroside on osteogenic differentiation of human bone marrow mesenchymal stem cells by regulating the SDF-1/CXCR4 signaling pathway
摘要目的 探究龙胆苦苷对人骨髓间充质干细胞(BMSC)成骨分化的影响,分析其机制是否与基质细胞衍生因子1(SDF-1)/C-X-C型趋化因子受体4(CXCR4)通路有关.方法 将BMSC分为正常培养的对照组、成骨诱导的模型组以及低剂量龙胆苦苷(L-龙胆苦苷,10 μmol/L)组、中剂量龙胆苦苷(M-龙胆苦苷,20 μmol/L)组、高剂量龙胆苦苷(H-龙胆苦苷,40 μmol/L)组、H-龙胆苦苷联合SDF-1/CXCR4通路抑制剂(AMD3100)(H-龙胆苦苷联合AMD3100,40 μmol/L龙胆苦苷联合10 μg/mL AMD3100)组.CCK-8试剂盒、流式细胞术、ALP染色、茜素红染色以及Western blot法分别检测细胞活性、细胞凋亡、ALP活性、矿化结节以及SDF-1/CXCR4通路相关蛋白水平.结果 对照组和模型组均未见矿化结节,但模型组颜色加深;模型组较对照组吸光度(A)值、ALP活性、Runt相关转录因子2(RUNX2)、骨桥蛋白(OPN)、SDF-1、CXCR4蛋白表达增加,凋亡率降低;与模型组相比,L-龙胆苦苷组、M-龙胆苦苷组、H-龙胆苦苷组A值、ALP活性、矿化结节、RUNX2、OPN、SDF-1、CXCR4蛋白表达依次增加,凋亡率依次降低;H-龙胆苦苷联合AMD3100组较H-龙胆苦苷组A值、ALP活性、矿化结节、RUNX2、OPN、SDF-1、CXCR4蛋白表达降低,凋亡率增加.结论 龙胆苦苷对BMSC成骨分化的促进作用可能是通过激活SDF-1/CXCR4信号通路实现.
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