换一批大鼠皮质少突胶质细胞培养条件的优化
Optimization of culture conditions for oligodendrocytes of the rat cerebral cortex
摘要背景：由于少突胶质细胞主要来自少突前体细胞，实验通过提取少突胶质前体细胞获取少突胶质细胞的过程中，选择合适的培养基和细胞接种密度对生长及形态学观察具有重要影响。目的：对比优化少突胶质细胞的培养条件。方法：取48 h内的SD新生鼠大脑皮质前体少突胶质细胞。分别用DMEM/高糖、DMEM/F12培养基培养少突胶质前体细胞，每组接种密度分别2×104/cm2，4×104/cm2，8×104/cm2，16×104/cm2，32×104/cm2，64×104/cm2；分别于少突胶质前体细胞贴壁72 h后，进行诱导分化，分化7 d后的少突胶质前体细胞在光镜下观察细胞形态变化并通过免疫荧光技术对细胞进行鉴定。结果与结论：DMEM/高糖、DMEM/F12培养基以2×104/cm2，4×104/cm2，8×104/cm2接种密度时，可辨识完整少突胶质前体细胞形态。诱导分化7d后，免疫荧光鉴定提示3组少突胶质前体细胞均可呈现髓鞘碱性蛋白阳性，F12组中2×104/cm2，4×104/cm2，8×104/cm2接种密度条件下细胞均数分别为16.40±3.30，49.95±2.33，76.95±4.86，高于相应条件下的高糖组12.65±2.53，32.10±1.17，54.05±1.56(P<0.05)。结果表明，DMEM/F12较DMEM/高糖培养基适于少突胶质细胞培养，在一定范围内，少突胶质前体细胞分化为少突胶质细胞随接种密度成梯度增多，接种密度在4×104/cm2-8×104/cm2范围对观察细胞形态观察较为适合。
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分类号
R318（医用一般科学）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.2095-4344.2016.29.010
发布时间
2016-07-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（11102235）
天津市科技支撑计划（14ZCZDGX00500）
天津市卫生局项目（2013KZ134）
天津市卫生局项目（2014KZ135）
武警后勤学院附属医院种子基金（FYM201417）
武警后勤学院附属医院种子基金（FYM201432）
武警后勤学院附属医院种子基金（FYM201542）
武警后勤学院附属医院种子基金（WHJ2015018）
武警后勤学院博士启动基金（WHB201417）
武警后勤学院博士启动基金（WHB201514）
武警后勤学院中心实验室开放基金（2015ZXKF01）
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