换一批
换一批JP2敲减抑制H9c2心肌细胞Caveolin-1膜蛋白的表达
JP2 knockdown inhibits Caveolin-1 membrane protein expression in H9c2 cardiomyocytes
摘要目的 探讨JP2敲减对H9c2心肌细胞Caveolin-1表达的影响.方法 构建靶向大鼠JP2基因的siRNA重组腺病毒载体(Ad-JP2-siRNA)和对照腺病毒载体(Ad-NC-siRNA),分别感染H9c2细胞.Real-Time PCR检测各组细胞JP2 mRNA水平,Western blotting结合表面生物素检测JP2蛋白和Caveolin-1总蛋白及膜蛋白的表达,免疫细胞化学检测Caveolin-1在H9c2细胞中的亚细胞定位.结果 与control组相比,转染Ad-JP2-siRNA 48 h后H9c2细胞中JP2 mRNA(1.000±0.000 vs 0.2939±0.0796,P<0.05)及蛋白(0.806±0.144 vs 0.233±0.101,P<0.05)的表达水平显著下降.Caveolin-1总蛋白表达水平无显著改变(1.797±0.082 vs 1.157±0.134,P>0.05),膜蛋白表达显著降低(1.156±0.132 vs 0.196±0.059,P<0.05).Caveolin-1主要分布于H9c2细胞膜,与转染Ad-JP2-siRNA细胞比较,Caveolin-1的膜分布明显减弱.结论 敲减JP2抑制H9c2细胞Caveolin-1蛋白表达.
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