换一批
换一批摘要目的探讨凋亡素基因表达对人肝癌细胞的影响.方法将凋亡素基因克隆入真核表达载体pEGFP-C2,构建成pEGFP-VP3.为了使EGFP和EGFP-VP3在人肝癌细胞中表达,用非脂质体脂质转染法将pEGFP-C2和pEGFP-VP3分别转染人类肝癌细胞系(HepG2),通过荧光显微镜观察EGFP和EGFP-VP3在HepG2中的定位、表达、细胞生长及凋亡,用AnnexinV-藻红素(PE)检测细胞凋亡.结果在HepG2/EGFP组细胞中,EGFP均匀分布于细胞浆和细胞核,细胞形态无变化.与非转染细胞的自然凋亡相比,转染细胞中细胞凋亡没有增加.在HepG2/EGFP-VP3组细胞中,EGFP-VP3以荧光颗粒形式集中在细胞核,细胞核中EGFP-VP3颗粒逐渐变粗,细胞变得小而圆,最后成为碎片,AnnexinV-PE染色显示细胞凋亡;HepG2/EGFP-VP3组的细胞凋亡率明显高于HepG2/EGFP组和HepG2组(P＜0.01).结论pEGFP-VP3转染人肝癌细胞后,凋亡素基因表达并导致癌细胞凋亡.
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