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mtDNA突变与大肠癌发病关系的基础研究

Preliminary study on the relationship of mutated mtDNA and colorectal cancer

摘要目的 观察大肠癌突变型mtDNA转导NIH3T3细胞后转染细胞的生物学特性.方法 通过脂质体法(lipofection2000TM)将大肠癌细胞突变的mtDNA真核表达载体转染NIH3T3细胞,利用G418抗性筛选克隆细胞;用荧光标记的染色体原位杂交(FISH)观察mtDNA在核内的整合情况;观察转染前后细胞异型性及进行染色体核型分析;PCR法检测转染细胞线粒体突变情况;流式细胞仪(FCM)检测转染细胞的凋亡情况;用四唑盐比色法(MTT)测定不同组间细胞增殖的吸光度值.结果 突变的大肠癌mtDNA可通过影响NIH3T3细胞的mtDNA的突变、多态性和通过外源性mtDNA在核内的整合从而影响NIH3T3细胞的染色体核型及细胞增殖、凋亡等生物学行为.结论 突变型mtDNA可能参与大肠癌的发生与发展.

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