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lncRNA ZFAS1调控HMGA2表达对肝癌细胞增殖、侵袭、迁移的影响

Effects of lncRNA ZFAS1 on the proliferation,invasion and migration of liver cancer cells by regulating HMGA2 expression

摘要目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)锌指蛋白反义链1(ZFAS1)通过调控高迁移率族蛋白A2(HMGA2)表达对肝癌细胞增殖、侵袭、迁移的影响.方法 利用GEPIA分析癌症基因组图谱(TCGA)数据库中肝癌组织和正常组织lncRNA ZFAS1和HMGA2 mRNA表达水平.实时定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测在本院收集的58对肝癌组织、癌旁组织以及体外培养的人正常肝细胞(QSG-7701)和肝癌细胞系(Hep3b、SK-HEP-1、HuH-7、HepG2)中lncRNA ZFAS1和HMGA2 mRNA表达水平.利用脂质体转染试剂对HepG2细胞进行转染,并分成Blank组、sh-NC组、sh-lncRNA ZFAS1组、sh-lncRNA ZFAS1+si-NC组和sh-lncRNA ZFAS1+si-HMGA2组,48 h后,细胞计数试剂盒8(CCK8)法评估细胞增殖情况;Transwell实验和划痕实验检测细胞侵袭和迁移;免疫共沉淀实验检测lncRNA ZFAS1和HMGA2的结合关系;蛋白免疫印迹法检测HMGA2蛋白水平.结果 与正常组织或癌旁组织相比,肝癌组织中lncRNA ZFAS1和HMGA2 mRNA表达均显著升高(P<0.05).与QSG-7701相比,Hep3b、SK-HEP-1、HuH-7、HepG2细胞中lncRNA ZFAS1和HMGA2 mRNA表达明显增加(P<0.05),其中lncRNA ZFAS1和HMGA2 mRNA在HepG2细胞中表达最高,因此选择该细胞进行转染实验.转染sh-lncRNA ZFAS1后,HepG2细胞中lncRNA ZFAS1表达明显降低,24 h、48 h、72 h的OD值明显减小,侵袭和迁移细胞数目明显减少,24 h的平均划痕距离明显增加(P<0.05).lncRNA ZFAS1和HMGA2在肝癌HepG2细胞中直接结合.同时转染sh-lncRNA ZFAS1和si-HMGA2后,HepG2细胞中HMGA2蛋白表达明显下降,24 h、48 h、72 h的OD值明显降低,侵袭和迁移细胞数显著减少,24 h的平均划痕距离明显增加(P<0.05).结论 lncRNA ZFAS1通过直接结合HMGA2促进肝癌细胞增殖、侵袭、迁移.

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分类号 R735.7R575
栏目名称 基础研究
DOI 10.3969/j.issn.1672-2159.2022.04.009
发布时间 2022-07-08
基金项目
广东省医学科研基金立项项目 佛山市自筹经费类科技计划项目
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