换一批
换一批miR-340通过靶向KIF14影响肝癌细胞耐药性的机制
Mechanism of mir-340 affecting drug resistance of hepatoma cells by targeting kif14
摘要目的 研究miR-340通过靶向驱动蛋白家族成员14(KIF14)影响肝癌细胞株耐药性的机制.方法 RT-PCR分别检测肝癌细胞株(HepG2)及肝癌耐药细胞株(HepG2/CDDP)内miR-30及KIF14 mRNA表达水平,瞬时转染miR-340模拟物与抑制物,采用PRT-PCT验证转染效果.MTT检测细胞药物半数致死剂量(IC50值)、流式细胞术检测细胞凋亡率,Westernblot法分析细胞内的耐药蛋白P-gp、GST-π表达水平.双荧光素酶报告与基因技术验证miR-340与KIF14的靶向关系.结果 与亲本细胞(HepG2)相比,HepG2/CDDP细胞株内miR-340 RNA表达量降低,KIF14 RNA表达量升高;抑制miR-340可提高HepG2细胞IC50值及细胞内P-pg与GST-π蛋白表达水平,降低其细胞凋亡率;过表达miR-340可提高HepG2/CDDP细胞凋亡率,降低其IC50值与细胞内P-pg及GST-π蛋白表达水平;双荧光素酶报告提示miR-340可负向调控KIF14,过表达KIF14可逆转过表达miR-340对HepG2/CDDP细胞的耐药性.结论 KIF14是miR-340的靶基因,miR-340能靶向KIF14,逆转肝癌HepG2/CDDP对化疗药物的耐药性.
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