人防御素-5基因毕赤酵母表达载体的构建及鉴定
CONSTRUCTION AND IDENTIFICATION OF HUMAN DEFENSIN-5 GENE IN EUKARYOTIC EXPRESSION VECTOR
摘要[目的]构建人防御素5(HD-5)基因的毕赤酵母表达载体并加以鉴定. [方法]采用PCR技术从人cDNA文库中扩增HD-5基因片段,将HD-5基因扩增产物和毕赤酵母表达载体pPICZαA用EcoR I和Xba I双酶切后连接构成重组质粒,然后转化到E.coli T0p10中,筛选阳性克隆,并进行PCR、酶切和序列鉴定. [结果]重组质粒经酶切获得HD-5基因片段大小正确,经序列测定证实HD-5基因正确插入pPICZαA中. [结论]成功构建人防御素5基因的毕赤酵母表达载体.
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