缺氧对肝癌细胞HepG2中HIF-1α和HKⅡ表达的影响
THE AFFECT OF HYPOXIA ON THE EXPRESSION OF HIF - 1α AND HK Ⅱ IN HepG2 OF HEPATOCARCINOMA CELL
摘要目的 探讨缺氧对肿瘤细胞周期调控的机制及乏氧诱导因子-1α(HIF-1α)、己糖激酶Ⅱ(HK Ⅱ)表达的影响.方法 人肝癌细胞HepG2分成3组:缺氧12 h组、缺氧24 h组及对照组.缺氧组分别在缺氧条件下(37 ℃,5% CO2、2.0%O2饱和度)培养12 h和24 h,对照组置于正常氧浓度条件下(37 ℃,5% CO2、21.0% O2饱和度)培养24h.流式细胞仪检测细胞周期分布,免疫组织化学S2P法检测HIF-1α表达,荧光定量PCR法检测HK Ⅱ mRNA表达量.结果 缺氧情况下细胞周期分析处于G0/G1期细胞百分比明显增多,处于G2/M期的细胞减少,并且可见到较明显的凋亡峰的形成,缺氧12 h组、缺氧24 h组的G0/G1期比例显著高于对照组(p<0.05);HIF-1α和HK Ⅱ在两组缺氧组与对照组比较,其表达量明显增加(p<0.05),缺氧24 h组与缺氧12 h组比较有显著性差异(p<0.05).结论 HIF-1α可刺激人肝癌细胞HK Ⅱ表达的增加,细胞阻滞在G0/G1期,以HIF-1α为药物靶点可望成为治疗肝癌基因治疗的新途径.
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